移液器的工作原理是活塞通過彈簧的伸縮運動來實現吸液和放液。 在活塞推動下，排出部分空氣， 利用大氣壓吸入液體， 再由活塞推動空氣排出液體。 使用移液器時，配合彈簧的伸縮性特點來操作，可以很好地控制移液的速度和力度。
正確的實驗操作可以規避大部分事故，而一個實驗儀器的正確使用，可以避免因為不標準的操作，影響實驗結果。
第一步，安裝吸頭
對于單道移液器來說，移液器末端垂直插入吸頭，輕壓左右微微轉動即可上緊；
對于多道移液器來說，將第一通道與最后一個通道的吸嘴與吸頭對齊后，垂直向下安裝吸頭，并左右小幅度搖擺。
不能反復撞擊移液器來確保吸頭氣密性，長期用這種方式裝配吸頭，會導致吸頭變形，移液器零部件因撞擊而松散，從而影響移液準確性。
第二、容量設定
正確的容量設定分為兩個步驟，第一個步驟是粗調——通過排放按鈕將容量值迅速調整至接近自己的預想值；第二個步驟是細調——當容量值接近自己的預想值以后，應將移液器橫置，水平放至自己的眼前，通過調節輪慢慢地將容量值調至預想值，避免視覺誤差所造成的影響。
在容量設定時，還有一個需要特別注意的地方。當我們從大體積調整到小體積時，逆時針旋轉至刻度就可以；但從小體積調整到大體積時，就需要調超過三分之一圈后再返回到我們預定的，這是因為計數器里面有一定的空隙，需要彌補。
第三、吸液和放液
吸液時，移液器按鈕按至第一檔，釋放按鈕，進行吸液。這里有四點需要注意：
1)垂直吸液；
2)5ml和10ml的移液器，吸頭需浸入液面5mm，慢吸液體，達到預定體積后，在液面下停頓3秒，再離開液面；
3)吸液時緩慢松開控制器，否則液體進入吸頭過快會導致液體倒吸入移液器內部；
4)吸取揮發液體時，需要潤洗吸頭4-6次，讓套筒室內的蒸汽飽和，可以避免產生漏液。
放液時，緊貼容器壁，先按到第一檔，略作停頓，再按至第二檔排除余液。
第四、拆卸吸頭
一般直接拔掉就可以，但需要注意卸掉的吸頭一定不能和新吸頭混放，以免產生交叉污染。
第五、移液器的正確放置
使用完畢，可以將其豎直掛在移液槍架上，但要小心別掉下來。當移液器槍頭里有液體時，不要把移液器水平放置或倒置，以免液體倒流腐蝕活塞彈簧。
